谷氨酸脫氫酶(GDH)試劑盒紫外分光光度法說明書
紫外分光光度法 50管/48樣
正式測定前務(wù)必取 2-3 個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
商品屬性:
產(chǎn)品名稱:谷氨酸脫氫酶(GDH)試劑盒紫外分光光度法
貨號:LZ-S0192-A
規(guī)格 : 50管/48樣
測試方法:紫外分光光度法
產(chǎn)品分類:氮代謝系列
發(fā)貨地:上海
測定意義:
GDH(EC 1.4.1.2)廣泛分布于植物中,和谷氨酸合成酶(GOGAT)共同參與谷氨酸的合成,在氨同化和轉(zhuǎn)化成有機(jī)氮化合物的代謝中起重要作用。
測定原理:
GDH催化NH4+、α-酮戊二酸和NADH,生成谷氨酸和NAD+,引起340nm吸光度下降。通過測定340nm吸光度的下降速率,計算GDH活性。
需自備的儀器和用品
紫外分光光度計、臺式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
試劑的組成和配制:
提取液:液體 60mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 60mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:粉劑×2 瓶,4℃保存;
生化檢測試劑盒操作步驟:
一、?準(zhǔn)備工具和環(huán)境?:確保操作臺面干凈、整潔,這是進(jìn)行科學(xué)實驗的步。
?二、?仔細(xì)閱讀說明書?:這是使用試劑盒的基礎(chǔ),說明書包含了所有必要的信息和操作指南。
三、樣本采集?:按照說明書的指導(dǎo),正確采集樣本。不同類型的檢測可能需要不同類型的樣本,如血液、唾液或鼻涕等。
?四、樣本混合?:將樣本與試劑小心混合,注意輕柔操作,避免產(chǎn)生泡沫,以確保檢測的準(zhǔn)確性。
?五、?等待反應(yīng)?:混合后,耐心等待試劑盒的反應(yīng),這個時間可以用來進(jìn)行其他活動,但不要著急,因為好的結(jié)果值得等待。
六、結(jié)果判讀?:時間到后,仔細(xì)判讀結(jié)果。試劑盒通常會有明確的指示,告訴你如何根據(jù)顯示的線條或顏色來判斷結(jié)果。
NAD+和 NADH 的提取:
1 血清(漿)中 NAD+和 NADH 的提取NAD+的提?。喊凑昭澹{)體積(mL):酸性提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議取約 0.1mL 血清(漿),加入 1mL 酸性提取液),60℃水浴 5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心 10min;取 500μL 上清液,加入 500μL 堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心 10min,取上清,置冰上待測。NADH 的提取:按照血清(漿)體積(mL):堿性提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議取約 0.1mL 血清(漿),加入 1mL 堿性提取液),60℃水浴 5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心 10min;取 500μL 上清液,加入 500μL 酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
2 組織中 NAD+和 NADH 的提取:NAD+的提?。喊凑战M織質(zhì)量(g):酸性提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議取約 0.1g組織,加入 1mL 酸性提取液),冰浴研磨,60℃水浴 5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心 10min;取 500μL 上清液,加入 500μL 堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
NADH 的提取:按照組織質(zhì)量(g):堿性提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議取約 0.1g
組織,加入 1mL 堿性提取液),冰浴研磨,60℃水浴 5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心 10min;取 500μL 上清液,加入 500μL 酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
3 細(xì)胞或細(xì)菌中 NAD+和 NADH 的提?。篘AD+的提?。合仁占?xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),棄上清,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個):酸性提取液體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 酸性提取液),超聲波破碎(冰浴,功率 20%或 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次),60℃水浴 5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心 10min;取 500μL 上清液,加入 500μL 堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心 10min,取上清,置冰上待測。NADH 的提取:先收集細(xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),棄上清,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個):堿性提取液體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 堿性提取液),超聲波破碎(冰浴,功率 20%或 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次),60℃水浴 5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心 10min;取 500μL 上清液,加入 500μL 酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
注意事項:
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。
公司正在出售的產(chǎn)品:
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CD38重組大鼠 SCARB3 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
ErbB-3/HER3(Epidermal growth factor receptor3 0.5mgErbB-3/HER3(Epidermal growth factor receptor3) 表皮生長因子受體3(抗原)
RSPO3重組人 RSPO3 / R-spondin 3 蛋白 (aa 1-146, His 標(biāo)簽) Protein
CD38 Protein Human 重組人 SCARB3 蛋白 (His & FLAG 標(biāo)簽)
CES2 Protein Mouse 重組小鼠 CES2 / Carboxylesterase-2 蛋白 (His 標(biāo)簽)
谷氨酸脫氫酶(GDH)試劑盒紫外分光光度法小鼠毒性休克綜合征毒素1(TSST-1)ELISA試劑盒 ,英文名: TSST-1 ELISA Kit
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人白介素17B(IL17B)試劑盒 Human IL17B ELISA Kit
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PROGELISA試劑盒魚孕激素/孕同規(guī)格:96T/48T
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780元
產(chǎn)品名:脂肪酸合成酶,紫外分光光度法,試劑盒
線粒體檸檬酸(MCA)含量試劑盒紫外分光光度法
975元
產(chǎn)品名:線粒體檸檬酸,紫外分光光度法,試劑盒
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產(chǎn)品名:乙酰輔酶A試劑盒,紫外分光光度法,試劑盒
?;D(zhuǎn)移酶(AAT)試劑盒可見分光光度法
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產(chǎn)品名:酰基轉(zhuǎn)移酶,可見分光光度法,試劑盒
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1300元
產(chǎn)品名:結(jié)合態(tài)淀粉合成酶,紫外分光光度法,試劑盒
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產(chǎn)品名:NO含量,可見分光光度法,試劑盒